重复提供特定的基质和环境条件，使混杂在其他微生物中的所需微生物旺盛生长繁殖的方法。在富集培养过程中淘汰与其同时存在的其他微生物，还可同时加入抑制剂以抑制其他微生物生长，便于分离所需微生物。例如，当伤寒病患者的粪便直接培养于固体培养基上时，往往由于其他微生物区系生长旺盛，而难以检测伤寒菌落；若将粪便加入到含亚硒酸盐的肉汤中进行富集培养，则普通微生物区系受到抑制，再将富集物移植于固体培养基上，伤寒菌落便极易检测。兹举实例说明如下：

提供特定基质培养：①根据硝化细菌属专性自养菌的特点，可在只含硫酸铵（或亚硝酸盐）为能源物质，而无其他任何有机物质的专性培养基中进行富集培养，为了增加硝化菌的数量，有效抑制伴生菌的生长，在重复移植的后期富集物中，不断补加能源（NH₄^＋、NO₂^-），富集培养效果更佳；②固氮菌具有能固定并利用大气氮的特性，常用无氮培养基对固氮菌进行富集培养，由于培养基中没有氮源，其他微生物无法生存，而固氮菌生长良好；③富集和分离某一有机化合物的降解菌时，采用以该化合物为唯一碳（氮）源的选择性培养基，只利于能以该化合物为碳（氮）源的微生物生长，其他微生物因缺乏可利用的碳（氮）源而无法生存。

提供特定条件培养：①对嫌气性微生物进行富集培养时，整个富集过程需提供无氧条件，可采用在培养基中添加定量的还原剂；在有吸氧剂（碱性焦性没食子酸）的密闭容器内或在抽真空充入高纯氮的条件下培养。嫌气性富集微生物的分离与纯化，亦需在无氧条件下进行；②土壤环流法是进行富集培养的特定装置，亦常被采用（见土壤环流术）。