指化学物一次大剂量或24小时内多次对生物体作用后，所产生的毒性。急性毒性试验主要了解半数致死量（LD₅₀或LC₅₀）及其斜率、急性阈剂量（浓度）、动物种间和性别间的差异，同时了解动物的中毒表现和毒作用的靶器官，为农药急性毒性分级标准和亚急性、慢性毒性试验的观察指标及染毒剂量提供依据。

首选成年健康大鼠或小鼠等啮齿类动物，经皮毒性测定时，还要用兔或豚鼠。将动物随机分组，每个剂量组大鼠一般为10只；小鼠为20只，雌雄各半；其他较大动物可以酌情减少，但不能影响测定LD₅₀值。试验前应在动物笼内适应3～5天，以观察其健康状况。

测定LD₅₀或LC₅₀时，要有足够的剂量组，一般为4～5个，各组剂量要有适当间距，以使动物出现不同程度的毒性反应。这些数据形成剂量—反应曲线，可用任何一种公认的统计方法计算LD₅₀或LC₅₀。

主要有三条染毒途径：①急性经口染毒。在经口染毒前须隔夜禁食但不禁水。以特制灌胃金属针将受试农药一次给予或在24小时内多次给予。给药后观察动物的中毒表现。②急性经皮染毒。在染毒前24小时，将受试动物躯干背部的被毛剪掉或剃掉（如兔、豚鼠）；或将腹部的被毛剪掉或剃掉（如大鼠、小鼠），要特别避免擦伤皮肤，因受伤处能改变皮肤的渗透性。涂敷面积约占总体表面积的10%。涂敷染毒时间视需要可为4小时、6小时或24小时。为了防止动物摄入农药，可以应用限制动物活动的制动器，但不能使动物完全陷于不能活动的状态。染毒结束时，立即清除残留的农药。③急性吸入染毒。将动物放入染毒柜内进行吸入染毒。染毒方式可分为仅以鼻、头部接触或全身置于染毒柜内接触农药。通常要保证染毒柜内空气的稳定性和适量的氧气及均一恒定分布的受试农药，因此最好采用动式染毒柜（见图）。如果无动式染毒条件，也可进行静式染毒。在染毒前必须根据动物种属、数量和染毒时间确定染毒装置的体积。吸入染毒常用的小鼠和大鼠每小时最低需气量分别为3.4升和31升。染毒时间一般为2小时。受试农药如为液态或固态雾粒（烟雾态或雾滴、粉粒），除测定浓度外还应测量粉粒或液滴的大小和分散度。应以实际测定的染毒柜内的浓度来表示动物染毒的浓度。

仔细观察动物的行为和中毒表现，包括皮肤、被毛、眼睛和粘膜、呼吸、循环、自主神经和中枢神经系统、四肢活动等的变化。特别要注意观察震颤、惊 、抽搐、流涎、稀便、嗜睡、昏迷等。例如给药后立即出现惊厥、运动失调和死亡，可能是神经毒性；经一段不活动期后的晚发性死亡可提示对肾或肝的作用。腹泻或竖毛表明可能为植物神经兴奋。要尽可能准确地记录出现中毒表现和死亡的时间。对试验期间死亡的动物都须进行肉眼尸检。当尸检发现有肉眼可见到的病变时，应对病变进行镜检以获得有用的资料。

由于农药的化学结构及其理化性质的差异，对试验动物的急性毒性作用亦不相同。有的农药在染毒后很快出现中毒症状或死亡，而有的农药在染毒数日之后才出现死亡。因此在测定LD₅₀或LC₅₀时，观察期一般为14天，遇有特殊农药也可适当缩短或延长。

动式染毒柜示意图