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无性杂交

使两个亲本的原生质体融合成为一个具双亲遗传物质的杂种细胞,并在人工培养下使之形成杂种果树的杂交方法。无性杂交不受亲缘关系限制,特别是某些不能有性杂交的果树,可以采用无性杂交方法育种,培育新的果树类型。其选择杂交亲本的范围比有性杂交更广泛,遗传基础更复杂。因此无性杂交对果树遗传和育种的研究具有重要的意义。

使两个亲本的原生质体融合成为一个具双亲遗传物质的杂种细胞,并在人工培养下使之形成杂种果树的杂交方法。无性杂交不受亲缘关系限制,特别是某些不能有性杂交的果树,可以采用无性杂交方法育种,培育新的果树类型。其选择杂交亲本的范围比有性杂交更广泛,遗传基础更复杂。因此无性杂交对果树遗传和育种的研究具有重要的意义。

生物学家在20世纪60年代初开始研究体细胞杂交技术,如异种DNA分子的引入,线粒体,叶绿体和核的移植,或原生质体的融合等。70年代以来,通过原生质体融合技术,已成功地获得烟草,矮牵牛的种间或品种间杂种。1985年的枳壳与Trovita橙的原生质体融合获得的植株,是柑橘无性杂交所取得的最新成果。

无性杂交技术,一般包括原生质体的分离,异种原生质体的融合,异核体的选择和培养成细胞团,然后再分化成植株。例如日本小林省藏等(1985年)从Trovita甜橙的珠心胚和枳壳实生苗的叶片分离的原生质体,用PEG6000为细胞融合剂,在MT培养基中添加0.6M的蔗糖和0.6%琼脂,原生质体接种密度为105/毫升,培养后由枳壳来的原生质体逐渐消失,甜橙原生质体逐渐形成不定形的白色群落,并进一步形成绿色的胚状体,将胚状体转入分化培养基继续培养,便发育成具有三出复叶的植株,其染色体数36条,为双二倍体,并从叶精油成分分析结果,也确认是由体细胞融合的杂种。

外源DN A分子的导入,采用基因工程进行异种基因的转移。大致步骤为:获得目的基因;目的基因与载体结合成重组DNA分子;重组DNA分子引入受体细胞,再筛选和表达。

细胞器的摄取,采用甲种原生质体摄取乙种细胞的质体,线粒体,叶绿体或核等细胞器,从而产生新型的杂种细胞。