简介

本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。

本标准代替农业部2031号公告—16—2013《转基因生物及其产品食用安全检测　蛋白质经口急性毒性试验》。

本标准与农业部2031号公告—16—2013相比，除编辑性修改外，主要技术变化如下：——修改了术语和定义，删除了“最大耐受剂量”的定义（见第3章，2013版的第3章）；——修改了原理表述，增加了耐受剂量的原理及结果描述（见第4章，2013版的第4章）；——修改了试剂，删除了“PBS溶液或其他溶剂”与“食用植物油”（见第5章，2013版的第5章）；——删除了实验动物的周龄“6周～8周”与小鼠选用“昆明或CD-1品系”和大鼠选用“Wistar或Sprague Dawley品系”的要求，小鼠体重由“18 g～22 g”修改为“18 g～25 g”（见第7章，2013版的第7章）；——删除了动物分组中的溶剂对照组，增加了蛋白纯度要求：“其中目的蛋白的纯度应为当前国内外技术能够达到的最高水平，并明确其余成分”；修改了动物只数，由“每组不少于12只动物，雌雄各半”修改为“每组至少选用雌雄两种性别的实验动物各5只”（见8.1，2013版的8.1）；——修改了受试蛋白的处理方法，删除了“PBS或其他溶剂溶解”和“脂溶性样品采用食用植物油溶解”，修改为“首选溶媒为水，推荐以水为溶媒的溶液/悬浮液/乳浊液。

也可使用羧甲基纤维素、淀粉等配成混悬液或糊状物等。

使用其他溶媒需说明理由。

”（见8.2，2013版的8.2）；——修改了动物禁食时间，动物禁食时间由“16 h”修改为“大鼠隔夜禁食16 h，小鼠禁食4 h”；增加了给药后继续禁食时间和给予饲料的要求：“给予受试蛋白后，大鼠需继续禁食3 h～4 h，小鼠需继续禁食1 h～2 h。

若采用分批多次给予受试蛋白，可根据染毒间隔时间的长短给予动物一定量的饲料。

”（见8.3.2，2013版的8.3.2）；——修改了灌胃体积，由“小鼠常用容量为20 mL/（kg·BW），大鼠常用容量为10 mL/（kg·BW）”修改为“小鼠常用灌胃体积为20 mL/（kg·BW），一般不超过40 mL/（kg·BW）；大鼠常用灌胃体积为10 mL/（kg·BW），一般不超过20 mL/（kg·BW）”（见8.3.4，2013版的8.3.3）；——修改了多次给予的表述，由“24 h内给予3次”修改为“24 h内多次给予受试蛋白，一般不超过3次”；时间间隔由“每次间隔6 h”修改为“每次间隔3 h～4 h”（见8.3.5，2013版的8.3.4）；——修改了中毒表现，增加了时间点的表述：“前30 min内至少观察一次，24 h和48 h内定时进行观察。

迟发死亡要连续观察14 d。

第15 d，安乐处死全部实验动物。

”（见8.3.6，2013版的8.4.3）；——增加了死亡动物解剖的要求：“对于实验期间死亡的动物以及实验结束后安乐处死的实验动物，均应进行大体解剖，观察并记录脏器病变情况，必要时进行病理切片观察。

”（见8.3.7）；——修改了MTD方法的表述，删除了原8.4.2“对于毒性较小，最大给予剂量下仍不产生致死效应的受试蛋白，采用最大耐受剂量法测定其MTD。

最大灌胃容量小鼠为40 mL/（kg·BW），大鼠为20 mL/（kg·BW）。

”修改为“给予目的蛋白剂量应达到5 000 mg/（kg·BW）。

否则，应说明理由。

”（见8.3，2013版的8.4.2）；——删除了急性毒性的分级标准，改为“根据GB 15193.3—2014中附录G判定受试蛋白的毒性分级。

”（见9.2，2013版的9.1）；——修改了耐受剂量法的结果表述，原表述为“若只有MTD数值，未得出LD₅₀，则表述为：该受试蛋白经口急性毒性最大耐受剂量为×× mg/（kg·BW）。

”修改为“按照限量法给予受试蛋白后，观察期内无受试蛋白毒性引起的动物死亡，则认为受试蛋白对该种动物的经口急性毒性耐受剂量大于该剂量，其LD₅₀大于该剂量。

结果表述为：该受试蛋白经口急性毒性耐受剂量大于×× mg/（kg·BW），其LD₅₀大于该剂量。

”（见9.1，2013版的9.2）。

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本标准由中华人民共和国农业部提出。

本标准由全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会（SAC/TC 276）归口。

本标准起草单位：农业部科技发展中心、中国农业大学、国家食品安全风险评估中心。

本标准主要起草人：黄昆仑、宋贵文、徐海滨、赵欣、刘珊、贺晓云、车会莲、许文涛、罗云波。

本标准的历次版本发布情况为：——农业部2031号公告—16—2013。