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饲料添加剂纤维素酶活力的测定分光光度法

标准图书状态：被替代

标准号： NY/T 912-2004

提出：中华人民共和国农业部

归口：全国饲料工业标准化技术委员会

起草单位：中国农业大学农业部饲料工业中心、芬兰饲料国际有限公司、广东溢多利生物技术股份有限公司、辽宁众博饲料科技有限公司、北京中农博特生物工程技术有限公司、武汉新华扬生物有限公司

发布：中华人民共和国农业部

本标准主要起草人：谯仕彦陆文清刘兴海

实施时间： 2005-02

简介

本标准的附录A为资料性附录。

目录

前言: 本标准的附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：中国农业大学农业部饲料工业中心、芬兰饲料国际有限公司、广东溢多利生物技术股份有...

1 范围: 本标准规定了用还原糖比色法测定饲料添加剂中纤维素酶的活力。本标准适用于饲料添加剂用的饲料酶产品，也适用于含有纤维素酶的添加剂预混合饲料。样品的最低检出量为1.0U/g。...

2 规范性引用文件: 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后的所有修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的...

3 术语和定义: 下列术语和定义适用于本标准。纤维素酶活力单位在37℃、pH为5.5的条件下，每分钟从浓度为4mg/mL的羧甲基纤维素钠溶液中降解释放1μmol还原糖所需要的酶量为一个酶活力单位（U）。...

4 原理: 纤维素酶能将羧甲基纤维素降解成寡糖和单糖。具有还原性末端的寡糖和有还原基团的单糖在沸水浴条件下可以与DNS试剂发生显色反应。反应液颜色的强度与酶解产生的还原糖量成正比，而还原糖的生成量又与反应液中...

5 试剂与溶液: 除特殊说明外，所用的试剂均为分析纯，水均为符合GB/T6682中规定的二级水。

6 仪器与设备: 6.1 实验室用样品粉碎机或碾钵。 6.2 分样筛孔径为0.25mm（60目）。 6.3 分析天平感量0.001g。 6.4 pH计精确至0.01。 6.5 磁力搅拌器附加热功能。 6.6 电磁振荡器 ...

7 标准曲线的绘制: 吸取缓冲液（5.4）4.0mL，加入DNS试剂（5.7）5.0mL，沸水浴加热5min。用自来水冷却至室温，用水定容至25.0mL，制成标准空白样。分别吸取葡萄糖溶液（5.5）1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL、6.00mL和7.00mL，分别用缓...

8 试样溶液的制备: 固体样品应粉碎或充分碾碎，然后过60目筛（孔径为0.25mm），按照附录A中建议的称样量称取试样2份，精确至0.001g。加入40mL乙酸—乙酸钠缓冲溶液（5.4）。磁力搅拌30min，再用缓冲溶液（5.4）定容至100mL，在4℃条件下避光...

9 测定步骤: 吸取10.0mL羧甲基纤维素钠溶液（5.6），37℃平衡10min。吸取10.0mL经过适当稀释的酶液，37℃平衡10min。吸取2.00mL经过适当稀释的酶液（已经过37℃平衡），加入到刻度试管中，再加入5mLDNS试剂（5.7），电磁振荡3s。然后加入...

10 试样酶活力的计算: 试样纤维素酶活力按式（1）、式（2）计算。饲料添加剂纤维素酶活力的测定分光光度法式中： X——试样稀释液的纤维素酶活力，单位为酶活力单位每毫升（U/mL）； A——酶反应液的吸光度； A——酶空...

11 重复性: 同一试样两个平行测定值的相对误差不超过8.0%，二者的平均值为最终的酶活力测定值（保留3位有效数字）。

附录A(资料性附录) 建议称样量: 附录A（资料性附录）建议称样量

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