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牛毛滴虫病诊断技术
牛毛滴虫病诊断技术
标准图书状态:
被替代
标准号:
NY/T 1471-2007
提出:
农业部市场与经济信息司(农业部质量办公室)
归口:
农业部畜牧兽医局质量标准办公室
起草单位:
南京农业大学动物医学院
发布:
中华人民共和国农业部
本标准主要起草人:
李祥瑞 徐立新 李春华
实施时间:
2008-03
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简介
临床观察根据临床病史,母牛早期流产、多次复配不孕或发情不规则、阴道分泌物增加、子宫蓄脓,公牛包皮黏膜有结节、分泌大量脓性物和不愿交配等病史或症状和体征可做出初步诊断。
目录
引言
毛滴虫病是由胎儿三毛滴虫(Tritrichomonas foetus)寄生于牛生殖道引起的疾病。该病呈世界性分布,引起牛,尤其是奶牛生殖器官炎症、死胎、流产和不育,对畜牧业生产造成严重的经济损失。毛滴虫病被世界动物卫生组...
1 范围
本标准适用于毛滴虫病的诊断。本标准规定了毛滴虫病的病原鉴定、聚合酶链反应(PCR)扩增虫体DNA的检测方法和结果判定标准。...
2 原理
2.1 胎儿三毛滴虫可在显微镜下直接观察,也可经姬姆萨染色法染色后观察。 2.2 以胎儿三毛滴虫虫体DNA作模板,应用特异性的引物进行PCR反应,能扩增出特异性的条带。...
3 主要材料和试剂
3.1 显微镜 3.2 载玻片 3.3 染色皿 3.4 姬姆萨(Giemsa)染色液 3.5 姬姆萨染色液稀释液 3.6 PCR仪 3.7 离心机 3.8 PBS(pH7.2 0.01mol/L) ...
4 检测步骤
4.1 临床观察
4.2 采样
4.3 虫体显微镜检查
4.4 PCR扩增虫体DNA检查法
5 结果判定
5.1 在显微镜下观察到胎儿三毛滴虫即可判为阳性。胎儿三毛滴虫呈纺锤形、梨形。体长8μm~18μm、宽4μm~9μm,呈活泼的蛇形运动。虫体的鞭毛及波动膜运动时,才可察知其存在。活动的虫体不易看出鞭毛,运动减弱时可见鞭...
6 结果报告
根据结果判定,做出报告。
附录A(资料性附录)标准中涉及的试剂配制方法
A.1 姬姆萨染色液
A.2 姬姆萨染色液稀释液
A.3 PBS(pH7.2 0.01mol/L)
A.4 CTAB抽提液
A.5 CTAB/NaCl溶液(10%CTAB/0.7mol/LNaCl)
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