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禽网状内皮增生病诊断技术

标准图书状态：被替代

标准号： NY/T 1247-2006

提出：中华人民共和国农业部

归口：全国动物防疫标准化技术委员会

起草单位：山东农业大学

发布：中华人民共和国农业部

本标准主要起草人：崔治中孙淑红

实施时间： 2007-02

简介

本标准的编制参考了世界动物卫生组织（OIE）的《诊断试验和疫苗标准手册》（2000版）有关章节。

本标准的附录A、附录B、附录C和附录D为规范性附录。

目录

前言: 禽网状内皮增生病病毒（Reticuloendotheliosis Viruses，REV）是一群不同于禽白血病病毒（Avian Leukosis Viruses，ALV）的反转录病毒，它包括一群血清学上密切相关的从不同种禽类分离到的病毒。代表毒株有：从患有...

1 范围: 本标准规定了禽网状内皮增生病诊断的技术要求。它包括两方面：对禽网状内皮增生病病毒（REV）特异血清抗体的检测；病料及生物制品中传染性REV的检测。本标准适用于：检测REV的特异性抗体，用以判断禽群体（场）或个体...

2 疾病的流行病学和致病作用: 禽网状内皮增生病的病原REV可感染鸡、火鸡、鹌鹑、鸭和鹅等多种家禽及一些野生鸟类。该病毒既可水平感染，也可通过鸡（禽）胚垂直感染。当种禽在开产后才感染REV时，会有一短暂的病毒血症期，此期间可造成垂直感染。此...

3 病毒的分离培养和鉴定

4 血清特异性抗体的检测: 检测鸡（禽）群（场）的REV抗体是否阳性或阳性率程度可用于以下几个流行病学研究的目的：①该鸡群（场）是否已有REV感染，SPF鸡群必须定期检测其中是否出现抗体阳性的群体；②根据种鸡开产前后对REV抗体阳性率的变化趋...

附录A（规范性附录）鸡胚成纤维细胞（CEF）的制备: 选择9日龄～10日龄发育良好的SPF鸡胚。先用碘酒棉再用酒精棉消毒蛋壳气室部位，无菌取出鸡胚，去头、四肢和内脏，放入灭菌的玻璃器皿内，用汉克氏液洗涤胚体。用灭菌的剪刀剪成米粒大的小组织块，再用汉克氏液洗2次...

附录B（规范性附录）MSB1细胞培养基配制: 商品化的DMEM液，加5%胎牛血清，pH7.6。青、链霉素：各250IU/mL。培养条件：37℃，5%CO2。

附录C（规范性附录）抗REV单因子鸡血清的制备: 选择经鉴定无任何其他潜在病毒的REV参考株作为种毒，接种CEF后复制和扩增病毒。CEF在接种病毒后，继续培养，每隔1天～2天换一次培养液，在第三次换液后48h收取上清液（通常可达到最高病毒效价），分装在小试管中，每...

附录D（规范性附录）IFA法抗体检测用REV感染细胞的制备: REV-CEF在10cm2CEF单层细胞瓶（皿）中加入103TCID50的REV悬液，隔一天换液。换液2天后将细胞单层用胰酶（见附录A）溶液消化分散成悬液，经离心后，重新悬浮于新鲜细胞培养液中。将细胞浓度调至每毫升5×105个细胞。在...

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