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绵羊痘和山羊痘诊断技术

标准图书状态:现行

标准号:NY/T 576-2015

提出:中华人民共和国农业部

归口:全国动物防疫标准化技术委员会(SAC/TC181)

起草单位:中国兽医药品监察所

发布:中华人民共和国农业部

本标准主要起草人: 支海兵 薛青红 印春生 李宁 王乐元 江焕贤

发布时间:2015-08

实施时间:2015-08

阅读

    本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

  • 前言

    本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准代替NY/T576—2002《绵羊痘和山羊痘诊断技术》。本标准与NY/T576—2002相比,病原检测部分增加了PCR检测方法。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国动物防...

  • 绵羊痘和山羊痘诊断技术

  • 1 范围

    本标准规定了绵羊痘和山羊痘(以下简称羊痘)的诊断方法。本标准所规定的临床检查和PCR试验适用于羊痘的诊断以及产地、市场、口岸的现场检疫;中和试验和PCR试验适用于羊痘的诊断、检疫和流行病学调查;电镜检查、包...

  • 2 缩略语

    下列缩略语适用于本文件。CPE:cytopathic effect 致细胞病变作用。H.E:hematoxylin-eosinstaining 苏木精—伊红染色。MEM:minimun essential medium 低限基础培养基。PCR:polymerase chain reaction 聚合酶链反...

  • 3 临床检查

  • 4 实验室诊断技术

  • 附录A(规范性附录) 营养液及溶液的配制

  • A.1 Hanks 液(10×浓缩液)

  • A.2 7.5%碳酸氢钠溶液

  • A.3 1.0%酚红溶液

  • A.4 0.25%胰蛋白酶溶液

  • A.5 EDTA-胰蛋白酶分散液(10×浓缩液)

  • A.6 抗生素溶液(1万IU/mL)

  • A.7 H-E染色液

  • A.8 MEM培养液

  • A.9 10%福尔马林溶液

  • 附录B(规范性附录) 绵羊羔睾丸细胞的制备

  • B.1 原代细胞制备

    选取4月龄以内健康雄性绵羊,以无菌手术摘取睾丸,剥弃鞘膜及白膜,剪成1mm~2mm小块,用Hanks 液(见A.1)清洗3次~4次。按睾丸组织量的6倍~8倍加入0.25%胰酶溶液(见A.4),置于37℃水浴消化。待睾丸组织呈膨松状,弃去...

  • B.2 次代细胞制备

    取生长良好的原代细胞,弃去生长液,加入原培养液量1/10的EDTA胰酶分散液(见A.5),消化2min~5min。待细胞层呈雪花状时,弃去胰酶分散液。加少许MEM培养液吹散细胞,然后按1:2的分种率,补足MEM培养液。混匀、分装细胞...