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转基因植物及其产品成分检测 抗虫耐除草剂玉米双抗12-5及其衍生品种定性PCR方法

标准图书状态:现行

标准号:农业部2259号公告-12-2015

提出:中华人民共和国农业部

归口:全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会(SAC/TC276)

起草单位:农业部科技发展中心,中国农业科学院油料作物研究所,农业部环境保护科研监测所

发布:中华人民共和国农业部

本标准主要起草人: 吴刚 沈平 武玉花 李昂 修伟明 朱莉 李允静

发布时间:2015-08

实施时间:2015-08

阅读

    本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

  • 前言

    本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国农业转基因生物安全管理标准化技术...

  • 转基因植物及其产品成分检测 抗虫耐除草剂玉米双抗12-5及其衍生品种定性PCR方法

  • 1 范围

    本标准规定了转基因抗虫耐除草剂玉米双抗12-5转化体特异性定性PCR检测方法。本标准适用于转基因抗虫耐除草剂玉米双抗12-5及其衍生品种,以及制品中双抗12-5转化体成分的定性PCR检测。...

  • 2 规范性引用文件

    下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法农业...

  • 3 术语和定义

    农业部1861号公告—3—2012界定的以及下列术语和定义适用于本文件。

  • 4 原理

    根据转基因抗虫耐除草剂玉米双抗12-5转化体特异性序列设计特异性引物和探针,对试样进行PCR扩增。依据是否扩增获得预期的DNA片段或典型扩增曲线,判断样品中是否含有双抗12-5转化体成分。...

  • 5 试剂和材料

    除非另有说明,仅使用分析纯试剂和重蒸馏水或符合GB/T6682规定的一级水。5.1 琼脂糖。5.2 10g/L溴化乙锭溶液:称取1.0g溴化乙锭(EB),溶解于100mL水中,避光保存。警告——溴化乙锭有致癌作用,配制和使用时应戴一次...

  • 6 主要仪器和设备

    6.1 分析天平:感量0.1g和0.1mg。6.2 PCR扩增仪:升降温速度>1.5℃/s,孔间温度差异<1.0℃。6.3 实时荧光定量PCR仪。6.4 电泳槽、电泳仪等电泳装置。6.5 紫外透射仪。6.6 凝胶成像系统或照相系统。...

  • 7 分析步骤

  • 8 结果分析与表述

  • 9 检出限

    9.1 普通PCR方法的检出限为0.1%(含靶序列样品DNA/总样品DNA)。9.2 实时荧光PCR方法的检出限为0.05%(含靶序列样品DNA/总样品DNA)。注:本标准的检出限是以PCR检测反应体系中加入100ngDNA模板进行测算的。...

  • 附录A(资料性附录) 抗虫耐除草剂玉米双抗12-5转化体特异性序列

    转基因植物及其产品成分检测 抗虫耐除草剂玉米双抗12-5及其衍生品种定性PCR方法